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如何配制teknova培养基?有哪些步骤?

发布日期:2022-11-17      点击:20
  pH值是培养基的常规监控项目,微生物的生长不仅依赖丰富的营养,还需要在适宜的pH值范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性。因此,teknova培养基pH值是否符合要求直接影响微生物检验结果。
  
  teknova培养基的配制:
  
  配料—溶解—调PH—过滤—分装—包扎—灭菌—摆斜面—贮存
  
  1、配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
  
  2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
  
  3、调PH:用1N的盐酸溶液或1N的NaOH溶液把培养基调节到所要求的值。
  
  4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)
  
  5、分装:一般teknova培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
  
  (1)三角瓶
  
  若作静置培养,则100mL培养基/250mL的三角瓶,不能超过150mL培养基/250mL的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20mL培养基/250mL的三角瓶,保证通气良好。
  
  (2)试管分装
  
  液体培养基一般装4-5mL,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4mL,约试管的1/5高度。
  
  6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
  
  7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
  
  8、摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
  
  9、贮存:teknova培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
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