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Coriell Institute细胞的实验和使用方法介绍

发布日期:2021-08-25      点击:91
  一、CoriellInstitute细胞实验方法:
  药敏片的制备:一般情况下,如无法获取,可以自行制备。首先定性滤纸,用内径为6mm的打孔器制备好纸片,按每包100片包装好,高压灭菌,烘干备用。然后,将待检药物用蒸馏水按实际用量的10倍稀释,充分溶解后,取1mL加到100片灭菌好的纸片上,放入4℃冰箱,待其充分吸收后(一般要4-8小时),平铺于平皿上,在37℃温箱中充分烘干,干燥后立即封装于灭菌的小瓶内,密闭保存。
  二、使用方法:
  培养基的制备:用托盘天平称取营养琼脂4克,加入洁净的容器内,再用量筒加入200mL蒸馏水,121℃,灭菌20分钟。灭菌后,冷却至50-60℃,在超净台内,迅速将培养基倒入灭菌的培养皿内,每个平皿15mL左右,轻摇平皿,使培养基分布均匀。待其冷却凝固后,即可使用。
  谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。
  CoriellInstitute细胞试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其浓度为2mM培养基。
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