Megazyme试剂盒抗性淀粉的测定方法

　　Megazyme试剂盒用于分析a-葡聚糖（包括淀粉，糖原，植物糖原和非抗性麦芽糊精），一个样品溶液的重复测定中，吸收值会有0.005至0.010的波动。当样品体积为1ml时，这相当于0.05-1ml/L浓度的D-葡萄糖。如果样品在准备过程中被稀释，结果需要乘以稀释倍数。例如在样品准备时，样品称重，如10g/L，变异范围将在0.02至0.05g/100g。

　　抗性淀粉的测定方法：样品使用淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振荡水浴孵育16小时，在这期间，通过两种酶的联合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成D-葡萄糖，孵育结束后，终止反应。离心上述溶液，收集上清勿弃，底部残留絮状团即为样品中的RS，用含水的IMS洗涤絮状团，洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前收集的上清混合。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂测定，这也是对样品中RS含量的测定，非抗性淀粉（可溶性淀粉）的测定可通过集中的上清液并定容至100mL，再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。

　　Megazyme试剂盒检测原理：洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体，将絮状团置于冰水浴中，加入2MKOH溶解，边溶解边用磁力搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将溶液调至中性，用AMG将淀粉定量水解为葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂（GOPOD）测定，这也是对样品中RS含量的测定。