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Megazyme试剂盒抗性淀粉的测定方法

发布日期:2022-02-23      点击:90
  Megazyme试剂盒用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麦芽糊精),一个样品溶液的重复测定中,吸收值会有0.005至0.010的波动。当样品体积为1ml时,这相当于0.05-1ml/L浓度的D-葡萄糖。如果样品在准备过程中被稀释,结果需要乘以稀释倍数。例如在样品准备时,样品称重,如10g/L,变异范围将在0.02至0.05g/100g。
  抗性淀粉的测定方法:样品使用淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振荡水浴孵育16小时,在这期间,通过两种酶的联合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育结束后,终止反应。离心上述溶液,收集上清勿弃,底部残留絮状团即为样品中的RS,用含水的IMS洗涤絮状团,洗涤后离心,再重复一次洗涤离心,收集离心后获得的上清,与之前收集的上清混合。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂测定,这也是对样品中RS含量的测定,非抗性淀粉(可溶性淀粉)的测定可通过集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。
  Megazyme试剂盒检测原理:洗涤后离心,再重复一次洗涤离心,收集离心后获得的上清,与之前收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体,将絮状团置于冰水浴中,加入2MKOH溶解,边溶解边用磁力搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将溶液调至中性,用AMG将淀粉定量水解为葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂(GOPOD)测定,这也是对样品中RS含量的测定。
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