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teknova培养基灭菌效果下降的6大因素分析

发布日期:2022-03-28      点击:842
  teknova培养基是结合解剖,生物化学和免疫学方法鉴定组织切片中特异性抗原-抗体相互作用的技术,以各种格式使用,但所有方法都涉及两个步骤:样品制备和标签。
  培养基用于基础研究,以了解生物组织不同部位细胞标志物和差异表达蛋白质的分布,用于异常细胞的染色,如在癌性肿瘤中,细胞增殖和细胞死亡(凋亡和坏死)的特异性标志物的染色。
  样品制备对于抗体-抗原相互作用的可视化至关重要,保持细胞形态,包括下面的组织结构并且还维持靶抗原的表位的方式来制备样品。固定用于保存组织,常见的试剂包括甲醛,多聚甲醛和戊二醛,它们都在不同程度上作用于蛋白质中的可逆交联共价键,但是这种固定有时会导致表位的掩蔽。因此,固定方案基于用于检测的组织和抗体进行实验确定和优化。
  造成teknova培养基灭菌效果下降的6大因素分析:
  影响培养基灭菌效果的因素除灭菌温度和时间外还有培养基的成分和物理状态、PH、微生物数量、微生物细胞含水量、微生物细胞菌龄和耐热性、蒸汽中空气的排除情况、搅拌和泡沫等。
  1、营养成分的保持:湿热灭菌时,微生物被杀死的同时,培养基的营养成分也遭到了一定的破坏,特别是氨基酸和维生素。如在121℃,仅20min,就有59%的赖氨酸及其他碱性氨基酸被破坏,蛋氨酸也有相当数量被破坏。在热的作用下某些营养成分还可能因受热而相互之间发生反应,造成培养基中原有营养成分的数量变化,因而影响培养基质量。
  2、微生物的耐热性:细菌芽孢的热阻较大,灭菌所需要的时间取决于把细菌芽孢减少到所规定数目的时间。
  3、pH值:对微生物的耐热性影响很大。
  4、培养基成分:油脂、糖类及蛋白质等组成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜、影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。
  5、泡沫:泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死其中的杂菌。
  6、颗粒:颗粒小,容易灭菌,颗粒大,则难灭菌。

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