Institute细胞的使用方法介绍
发布日期:2020-08-19 点击:1677
Institute细胞要要想在培养基中生长,便要创造细胞能够生长的缓冲系统。细胞较脆弱一旦暴露在不适宜的环境中便会立马死亡。
在对培养基的环境进行调试的时候,要做成一套缓冲系统,能够在方方面面照顾到细胞的成长,在细胞培养基中接入碳酸氢钠让其与空气中的二氧化碳平衡,设置一定量的培养液,让细胞正常的成长。并且在培养的过程中,不要把细胞培养基的盖得太紧,以免造成氧气的缺失,影响细胞的活性。
使用方法
Institute细胞是一种高度分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。取出细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
吸出细胞培养瓶中的培养基,添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml*培养基终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;待细胞*贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。